PCR para detectar ARN circular en Diabetes Mellitus tipo 2

Tema: Detección de ARN circular asociado en la diabetes mellitus tipo 2

Objetivo: Detectar la relación del ARN circular en la diabetes mellitus tipo 2 mediante PCR de retrotranscripción (TR-PCR)

Muestra: Sangre

Tipo de ácido nucleico: ADN complementario obtenido por retrotranscripción del ARN circular

Extracción del ácido nucleico: Extracción de ARN en leucocitos y plasma con TRIzol y TRIzol LS (Invitogen; Thermo Fisher Scientific, Inc.).

Genes: circANKRD36

Tipo de PCR: RT-PCR

• Números de ciclos: 30
• Desnaturalización: 98°C por 10 segundos
• Hibridación: 56°C por 10 segundos
• Extensión:  72°C por 10 segundos

Visualización: EFO

Resultado de electroforesis de circANKRD36. Disponible en:https://www.spandidos-publications.com/10.3892/ijmm.2018.3783?text=abstract

Referencia:

Fang Y. Detección de ARN circulares y validación de circANKRD36 asociado con inflamación en pacientes con diabetes mellitus tipo 2 [Internet]. Revista Internacional de Medicina Molecular. 2018; 42: 1865-1874. Disponible en: https://www.spandidos-publications.com/10.3892/ijmm.2018.3783?text=abstract

ALTERACIONES EN LA TRADUCCIÓN DEBIDO AL COVID-19

El Covid 19 es una enfermedad infecciosa causada por el virus SARS-CoV-2, que provoca problemas respiratorios de forma leve y moderada. Para infectar a las células, este modifica su traducción de la siguiente manera: este proceso se realiza por 2 marcos abiertos de lectura en el extremo 5’, ORF1a y ORF1b. Mientras que el resto de NSP (proteínas no estructurales) se expresan desde otros ORFs presentes en el extremo 3’ del ARN. Las NSP3, 4 y 6  forman vesículas de doble membrana a partir del RER, donde se producen ARNg- y múltiples subgenómicos (ARNsg-), los cuales al traducirlos completan el proteoma viral. 

Disponible en: https://www.isglobal.org/coronavirus

Referencia:

• Argüello H. Caracterización y fisiopatología del Sars-Cov-2. Revisión de la literatura actual [Internet]. MÉD.UIS. 2021;34(2):61-75. Disponible en: https://revistas.uis.edu.co/index.php/revistamedicasuis/article/view/12659

ALTERACIONES EN LA TRANSCRIPCIÓN EN LA DIABETES MELLITUS TIPO 2

La diabetes mellitus tipo 2 es una enfermedad multifactorial, caracterizada por resistencia a la insulina y pérdida de función de las células β pancreáticas. Un factor clave es la transcripción anómala del receptor de la insulina (INSR), el cual generalmente posee 22 exones y 21 intrones. Pero al transcribirse el exón 11, produce 2 isoformas de INSR (A o B), que aumenta la prevalencia de la resistencia a la insulina. En adición, se puede mencionar a la transcripción anómala del gen TCF7L2, relacionada con polimorfismos de 1 sólo nucleótido que aumenta el riesgo de padecer diabetes mellitus tipo 2.

Disponible en: https://www.endocrino.cat/es/blog-endocrinologia.cfm/ID/13970/ESP/-afecta-edad-que-se-diagnostica-diabetes-tipo-mellitus-tipo-2-control-esta-.htm

Referencia:

• Moreno M. Papel de la alteración del proceso de splicing en la aparición de enfermedades endocrino-metabólicas y patologías tumorales [Internet]. Universidad de Córdoba. 2019. p. 22. Disponible en: https://helvia.uco.es/xmlui/handle/10396/18565